Osteoarthritis (OA) ແມ່ນຫນຶ່ງຂອງພະຍາດກະດູກຫັກຊໍາເຮື້ອໃນໄລຍະຍາວທີ່ມີຜົນກະທົບກ່ຽວກັບປະຊາກອນທີ່ມີອາຍຸເກີນ 65 ປີ.
1]. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ຄົນເຈັບ OA ໄດ້ຖືກກວດພົບວ່າມີກະດູກອ່ອນທີ່ຖືກທໍາລາຍ, synovium ອັກເສບ, ແລະ chondrocytes ເຊາະເຈື່ອນ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມເຈັບປວດແລະຄວາມຫຍຸ້ງຍາກທາງດ້ານຮ່າງກາຍ [
2]. ອາການປວດຂໍ້ອັກເສບສ່ວນຫຼາຍແມ່ນເກີດມາຈາກການເສື່ອມຂອງກະດູກອ່ອນໃນຂໍ້ຕໍ່ໂດຍການອັກເສບ, ແລະເມື່ອກະດູກອ່ອນຖືກທໍາລາຍຢ່າງຫນັກ ກະດູກສາມາດຂັດກັນເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດຄວາມເຈັບປວດທີ່ບໍ່ສາມາດທົນໄດ້ແລະຄວາມລໍາບາກທາງດ້ານຮ່າງກາຍ [
3]. ການມີສ່ວນຮ່ວມຂອງຜູ້ໄກ່ເກ່ຍອັກເສບທີ່ມີອາການຕ່າງໆເຊັ່ນ: ອາການເຈັບປວດ, ອາການໃຄ່ບວມ, ແລະຄວາມແຂງຂອງຂໍ້ຕໍ່ໄດ້ຖືກບັນທຶກໄດ້ດີ. ໃນຄົນເຈັບ OA, cytokines ອັກເສບ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ເກີດການເຊາະເຈື່ອນຂອງກະດູກອ່ອນແລະກະດູກ subchondral ແມ່ນພົບເຫັນຢູ່ໃນນ້ໍາ synovial [
4]. ສອງຄໍາຮ້ອງທຸກທີ່ສໍາຄັນທີ່ຄົນເຈັບ OA ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນອາການເຈັບປວດແລະການອັກເສບ synovial. ເພາະສະນັ້ນ, ເປົ້າຫມາຍຕົ້ນຕໍຂອງການປິ່ນປົວ OA ໃນປະຈຸບັນແມ່ນເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເຈັບປວດແລະການອັກເສບ. [
5]. ເຖິງແມ່ນວ່າການປິ່ນປົວ OA ທີ່ມີຢູ່, ລວມທັງຢາທີ່ບໍ່ແມ່ນຢາສະເຕີຣອຍແລະຢາສະເຕີຣອຍ, ໄດ້ພິສູດປະສິດທິພາບໃນການຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເຈັບປວດແລະການອັກເສບ, ການນໍາໃຊ້ໄລຍະຍາວຂອງຢາເຫຼົ່ານີ້ມີຜົນກະທົບສຸຂະພາບຮ້າຍແຮງເຊັ່ນ: cardiovascular, ກະເພາະລໍາໄສ້, ແລະ renal dysfunction [.
6]. ດັ່ງນັ້ນ, ຢາທີ່ມີປະສິດຕິຜົນຫຼາຍທີ່ມີຜົນຂ້າງຄຽງຫນ້ອຍຕ້ອງໄດ້ຮັບການພັດທະນາສໍາລັບການປິ່ນປົວໂລກຂໍ້ອັກເສບ.
ຜະລິດຕະພັນສຸຂະພາບທໍາມະຊາດແມ່ນໄດ້ຮັບຄວາມນິຍົມເພີ່ມຂຶ້ນເພື່ອຄວາມປອດໄພແລະໄດ້ຢ່າງງ່າຍດາຍ [
7]. ຢາພື້ນເມືອງຂອງເກົາຫຼີໄດ້ພິສູດປະສິດທິພາບຕໍ່ກັບພະຍາດອັກເສບຫຼາຍຊະນິດ, ລວມທັງໂລກຂໍ້ອັກເສບ [
8]. Aucklandia lappa DC. ເປັນທີ່ຮູ້ຈັກສໍາລັບຄຸນສົມບັດເປັນຢາຂອງຕົນ, ເຊັ່ນ: ເສີມຂະຫຍາຍການໄຫຼວຽນຂອງ qi ສໍາລັບບັນເທົາອາການເຈັບປວດແລະ soothing ກະເພາະອາຫານ, ແລະໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ຕາມປະເພນີເປັນຢາແກ້ປວດທໍາມະຊາດ [.
9]. ບົດລາຍງານທີ່ຜ່ານມາແນະນໍາວ່າ A. lappa ມີສານຕ້ານການອັກເສບ [
10,
11], ແກ້ປວດ [
12], ຕ້ານມະເຮັງ [
13], ແລະ gastroprotective [
14] ຜົນກະທົບ. ກິດຈະກໍາທາງຊີວະພາບຕ່າງໆຂອງ A. lappa ແມ່ນເກີດມາຈາກສານປະກອບທີ່ສໍາຄັນຂອງມັນ: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone ແລະ costuslactone [
15]. ການສຶກສາກ່ອນຫນ້ານີ້ອ້າງວ່າ costunolide ສະແດງໃຫ້ເຫັນຄຸນສົມບັດຕ້ານການອັກເສບໃນ lipopolysaccharide (LPS), ເຊິ່ງ induced macrophages ໂດຍຜ່ານລະບຽບການຂອງ NF-kB ແລະເສັ້ນທາງທາດໂປຼຕີນຈາກອາການຊ໊ອກຄວາມຮ້ອນ [.
16,
17]. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ບໍ່ມີການສຶກສາໃດໆທີ່ໄດ້ສືບສວນກິດຈະກໍາທີ່ເປັນໄປໄດ້ຂອງ A. lappa ສໍາລັບການປິ່ນປົວ OA. ການຄົ້ນຄວ້າໃນປະຈຸບັນໄດ້ສືບສວນຜົນກະທົບດ້ານການປິ່ນປົວຂອງ A. lappa ຕໍ່ກັບ OA ໂດຍໃຊ້ (monosodium-iodoacetate) MIA ແລະຕົວແບບຈໍາລອງຫນູທີ່ມີອາຊິດອາຊິດ.
Monosodium-iodoacetate (MIA) ຖືກນໍາໃຊ້ທີ່ມີຊື່ສຽງເພື່ອຜະລິດພຶດຕິກໍາຄວາມເຈັບປວດຫຼາຍແລະລັກສະນະ pathophysiological ຂອງ OA ໃນສັດ [
18,
19,
20]. ໃນເວລາທີ່ສັກເຂົ້າໄປໃນຂໍ້ຕໍ່ຫົວເຂົ່າ, MIA disarrays chondrocyte metabolism ແລະ induces ການອັກເສບແລະອາການອັກເສບ, ເຊັ່ນ: cartilage ແລະການເຊາະເຈື່ອນຂອງກະດູກ subchondral, ອາການ cardinal ຂອງ OA [.
18]. ການຕອບໂຕ້ Writhing induced ກັບ acetic acid ແມ່ນຖືວ່າເປັນການຈໍາລອງຂອງຄວາມເຈັບປວດ peripheral ໃນສັດບ່ອນທີ່ອາການເຈັບປວດອັກເສບສາມາດວັດແທກປະລິມານໄດ້ [
19]. ເສັ້ນຈຸລັງ macrophage ຂອງຫນູ, RAW264.7, ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນທີ່ນິຍົມເພື່ອສຶກສາການຕອບສະຫນອງຂອງເຊນຕໍ່ການອັກເສບ. ເມື່ອເປີດໃຊ້ກັບ LPS, RAW264 macrophages ກະຕຸ້ນເສັ້ນທາງອັກເສບແລະ secrete ຕົວກາງອັກເສບຫຼາຍ, ເຊັ່ນ TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, ແລະ IL-6 [.
20]. ການສຶກສານີ້ໄດ້ປະເມີນຜົນກະທົບຕໍ່ຕ້ານ nociceptive ແລະຕ້ານການອັກເສບຂອງ A. lappa ຕໍ່ກັບ OA ໃນຕົວແບບສັດ MIA, ຕົວແບບສັດທີ່ມີກົດ acetic, ແລະ LPS-activated RAW264.7 cells.
2. ວັດສະດຸ ແລະ ວິທີການ
2.1. ວັດສະດຸພືດ
ຮາກແຫ້ງຂອງ A. lappa DC. ນໍາໃຊ້ໃນການທົດລອງໄດ້ຖືກຈັດຊື້ຈາກ Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (ກຸງໂຊລ, ເກົາຫຼີ). ມັນໄດ້ຖືກລະບຸໄວ້ໂດຍສາດສະດາຈານ Donghun Lee, Dept. of Herbal pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, and the voucher specimen number is deposited as 18060301.
2.2. ການວິເຄາະ HPLC ຂອງສານສະກັດຈາກ A. lappa
A. lappa ໄດ້ຖືກສະກັດອອກໂດຍໃຊ້ອຸປະກອນ reflux (ນ້ໍາກັ່ນ, 3 h ທີ່ 100 °C). ການແກ້ໄຂທີ່ສະກັດອອກມາໄດ້ຖືກກັ່ນຕອງແລະ condensed ໂດຍໃຊ້ evaporator ຄວາມກົດດັນຕ່ໍາ. A. ສານສະກັດຈາກ lappa ໃຫ້ຜົນຜະລິດ 44.69% ຫຼັງຈາກຕາກແຊ່ແຂງພາຍໃຕ້ −80 °C. ການວິເຄາະ Chromatographic ຂອງ A. lappa ໄດ້ດໍາເນີນການກັບ HPLC ທີ່ເຊື່ອມຕໍ່ໂດຍໃຊ້ລະບົບ 1260 InfinityⅡ HPLC (Agilent, Pal Alto, CA, USA). ສໍາລັບການແຍກ chromatic, ຖັນ EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ຢູ່ທີ່ 35 °C. ຈໍານວນທັງຫມົດຂອງ 100 ມລກຂອງຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກ diluted ໃນ 10 mL ຂອງ 50% methanol ແລະ sonicated ສໍາລັບ 10 min. ຕົວຢ່າງໄດ້ຖືກກັ່ນຕອງດ້ວຍການກັ່ນຕອງ syringe (Waters Corp., Milford, MA, USA) ຂອງ 0.45 μm. ອົງປະກອບຂອງໄລຍະມືຖືແມ່ນ 0.1% ອາຊິດ phosphoric (A) ແລະ acetonitrile (B) ແລະຖັນໄດ້ຖືກ eluted ດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້: 0-60 min, 0%; 60–65 ນາທີ, 100%; 65–67 ນາທີ, 100%; 67–72 ນາທີ, 0% ທາດລະລາຍ B ດ້ວຍອັດຕາການໄຫຼຂອງ 1.0 ມລ/ນາທີ. ການລະບາຍນ້ໍາໄດ້ຖືກສັງເກດເຫັນຢູ່ທີ່ 210 nm ໂດຍໃຊ້ປະລິມານການສີດຂອງ 10 μL. ການວິເຄາະໄດ້ຖືກປະຕິບັດໃນ triplicate.
2.3. ທີ່ຢູ່ອາໄສຂອງສັດແລະການຄຸ້ມຄອງ
ໜູ Sprague-Dawley (SD) ເພດຊາຍ ອາຍຸ 5 ອາທິດ ແລະ ໜູ ICR ເພດຊາຍ ອາຍຸ 6 ອາທິດ ໄດ້ຊື້ມາຈາກ Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). ສັດໄດ້ຖືກເກັບຮັກສາໄວ້ໃນຫ້ອງໂດຍໃຊ້ອຸນຫະພູມຄົງທີ່ (22 ± 2 ° C) ແລະຄວາມຊຸ່ມຊື່ນ (55 ± 10%) ແລະຮອບວຽນແສງສະຫວ່າງ / ມືດຂອງ 12/12 h. ສັດໄດ້ຄຸ້ນເຄີຍກັບສະພາບດັ່ງກ່າວເປັນເວລາຫຼາຍກວ່າຫນຶ່ງອາທິດກ່ອນທີ່ຈະເລີ່ມຕົ້ນການທົດລອງ. ສັດໄດ້ມີການສະໜອງອາຫານ ແລະ ນ້ຳ. ກົດລະບຽບດ້ານຈັນຍາບັນໃນປະຈຸບັນສໍາລັບການດູແລສັດແລະການຈັດການສັດຢູ່ມະຫາວິທະຍາໄລ Gachon (GIACUC-R2019003) ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຕາມຢ່າງເຂັ້ມງວດໃນທຸກຂັ້ນຕອນການທົດລອງສັດ. ການສຶກສາໄດ້ຖືກອອກແບບໃຫ້ນັກສືບສວນ-ຕາບອດ ແລະການທົດລອງຂະໜານ. ພວກເຮົາປະຕິບັດຕາມວິທີການ euthanasia ຕາມຄໍາແນະນໍາຂອງຄະນະກໍາມະການດ້ານຈັນຍາບັນຂອງການທົດລອງສັດ.
2.4. ການສັກຢາ MIA ແລະການປິ່ນປົວ
ໜູຖືກແຍກອອກເປັນ 4 ກຸ່ມຄື: ແຊມ, ຄວບຄຸມ, ອິນໂດເມທາຊິນ ແລະ A. lappa. ຖືກຢາສລົບດ້ວຍສານປະສົມ isofluorane O2 2%, ໜູໄດ້ຖືກສັກໂດຍໃຊ້ 50 μL ຂອງ MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-articularly into the knee joints to lead to the experimental OA. ການປິ່ນປົວໄດ້ຖືກດໍາເນີນດັ່ງລຸ່ມນີ້: ການຄວບຄຸມແລະກຸ່ມ sham ໄດ້ຖືກຮັກສາໄວ້ດ້ວຍອາຫານພື້ນຖານ AIN-93G ເທົ່ານັ້ນ. ພຽງແຕ່, ກຸ່ມ indomethacin ໄດ້ຖືກສະຫນອງດ້ວຍ indomethacin (3 mg/kg) ລວມເຂົ້າໄປໃນອາຫານ AIN-93G ແລະ A. lappa 300 mg/kg ກຸ່ມໄດ້ຖືກມອບໃຫ້ອາຫານ AIN-93G ເສີມດ້ວຍ A. lappa (300 mg/kg). ການປິ່ນປົວໄດ້ຖືກສືບຕໍ່ເປັນເວລາ 24 ມື້ນັບຕັ້ງແຕ່ມື້ຂອງການກະຕຸ້ນ OA ໃນອັດຕາ 15-17 g ຕໍ່ນ້ໍາຫນັກຕົວ 190-210 g ຕໍ່ມື້.
2.5. ການວັດແທກນ້ໍາຫນັກ
ຫຼັງຈາກ OA induction, ການວັດແທກຄວາມອາດສາມາດຂອງນ້ໍາຫນັກຂອງແຂນຂາຂອງຫນູໄດ້ຖືກປະຕິບັດດ້ວຍ incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) ຕາມກໍານົດ. ການກະຈາຍນ້ໍາຫນັກຢູ່ປີກຫລັງໄດ້ຖືກຄິດໄລ່: ຄວາມອາດສາມາດຮັບນ້ໍາຫນັກ (%).
